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間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù):318 更新時(shí)間:2025-02-09

間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒

,成骨誘導(dǎo)液

貨號(hào):YJ-MSCYD-002

價(jià)格: 1280.0

規(guī)格: 100ml    200ml

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品為團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒,可增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的能力。

本產(chǎn)品僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

產(chǎn)品組成成分及保存

試劑名稱

體積(100mL規(guī)格/200mL規(guī)格)

保存條件及有效期

誘導(dǎo)分化添加劑

5mL / 10mL

-20℃1 Year

優(yōu)質(zhì)胎牛血清

10mL / 20mL

-20℃1 Year

細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

85mL / 170mL

4℃1 Year

茜素紅染色液

5mL / 10mL

RT(室溫),1 Year

注意:1.為保證產(chǎn)品的有效性,請(qǐng)避免反復(fù)凍融。

2. 配制好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基保存于2-8℃,有效期為2周,請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量合理配制。

產(chǎn)品使用說(shuō)明

1. 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基的配制

室溫條件下融化添加劑及血清。(注意:若添加劑或血清中有沉淀物,屬正常現(xiàn)象,無(wú)須過(guò)濾,避免成分丟失。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量,于無(wú)菌操作臺(tái)中配制完全培養(yǎng)基,建議每次配制50mL,先加細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基和胎牛血清,再加誘導(dǎo)分化添加劑。(配制比例見(jiàn)表一)

試劑成分

配制比例

50mL配制體系

誘導(dǎo)分化添加劑

5%

2.5mL

優(yōu)質(zhì)胎牛血清

10%

5mL

細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

85%

42.5mL

                                                                                 表一

2. 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)步驟

包被細(xì)胞培養(yǎng)瓶/板:向細(xì)胞培養(yǎng)器皿中加入0.1%明膠溶液,輕微晃動(dòng),使包被液完全覆蓋培養(yǎng)器皿底面,置于37℃培養(yǎng)箱中孵育30min,吸除液體即可使用。

建議取第3~5代、純度達(dá)90%以上、狀態(tài)良好的間充質(zhì)干細(xì)胞,將其消化收集,使用含10%FBS的完全培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度,均勻鋪于包被好的培養(yǎng)瓶/板中,置于37℃5%CO2,飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(細(xì)胞接種詳情參考表二)

培養(yǎng)器皿

底面積

細(xì)胞量

培養(yǎng)液體積

24孔培養(yǎng)板

2cm/

2×105cell/

1mL/

12孔培養(yǎng)板

4.5cm/

4.5×105cell/

2mL/

6孔培養(yǎng)板

9.6cm/

9.6×105cell/

2mL/

T25培養(yǎng)瓶

25cm

25×105cell

5mL

6cm培養(yǎng)皿

21cm

21×105cell

5mL

10cm培養(yǎng)皿

55cm

55×105cell

10mL

                                                       表二

待細(xì)胞匯合度達(dá)約90%時(shí),即可進(jìn)行誘導(dǎo)分化。

小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

注意:完全培養(yǎng)基加入細(xì)胞前需提前置于37℃預(yù)熱。

2~3day換用新鮮的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基。換液時(shí),若細(xì)胞培養(yǎng)上清顏色變?yōu)槌吻宓狞S色,是由于細(xì)胞量較大,營(yíng)養(yǎng)消耗較快導(dǎo)致的,請(qǐng)及時(shí)縮短換液周期。

細(xì)胞誘導(dǎo)2~4周后,即可進(jìn)行茜素紅染色鑒定。(注意:請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下確認(rèn)鈣結(jié)節(jié)形成后,再進(jìn)行染色鑒定。

3. 茜素紅染色分析

細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)束后,小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,1×PBS潤(rùn)洗1~2次,室溫固定30 min。(細(xì)胞固定液為4%中性甲醛溶液等,體積參考表二)

吸棄細(xì)胞固定液,1×PBS潤(rùn)洗2次。沿孔壁緩慢加入茜素紅染色液,染液體積請(qǐng)參考表二,室溫染色30min。(注意:染色液底部可能會(huì)有沉淀,吸取時(shí)盡量不要觸及底部。若細(xì)胞染色后有沉淀,1×PBS洗去即可。

吸出染色液,1×PBS潤(rùn)洗,去掉浮色。顯微鏡下觀察細(xì)胞染色效果,鈣鹽呈較深的橙紅色。(注意:染色液可重復(fù)使用,建議收集。

間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒

質(zhì)量控制

無(wú)菌檢測(cè)(細(xì)菌、真菌和支原體檢測(cè))

pH測(cè)試

滲透壓檢測(cè)

內(nèi)毒素

相關(guān)產(chǎn)品

間充質(zhì)干細(xì)胞

原代間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)體系,貨號(hào):PriMed-YJ-012-SF

l PBS緩沖液,貨號(hào):YJ-0800  

注意事項(xiàng)

僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來(lái)水沖洗即可。

2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):




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